|
Nghiên cứu chế tạo bộ kit real-time PCR phát hiện và định lượng một số đột biến gen ty thể phổ biến
/ GS.TS. Phạm Trần Nghĩa (chủ nhiệm đề tài)
, TS. Nguyễn Thị Hồng Loan, ThS. Nguyễn Văn Minh, TS. Vũ Thị Thu, ThS. Phùng Bảo Khánh, TS. Cao Vũ Hùng.
- Hà Nội :
Đại học Khoa học Tự nhiên
, 2018.
- 100
|
|
Sản xuất được bộ kit Mito-6-mutations q.PCR nhằm phát hiện và định lượng 6 đột biến gen ty thể phổ biến là A3243G, G3380A (MELAS), A8344G (MERRF), T8993G, T8993C (Leiuh), GI 1778A (LHON) trong cùng một điều kiện real-time PCR sử dụng mẫu dò dạng câu khóa; axitnucleic. Việc tạo master mix có vai trò quyết định, bộ kit khi được bảo quan trong 7 ngày ở 25°c hoặc ở 4°c trong 20 ngày và 6 tháng ở -20°c vẫn cho kết quả phát hiện và định lượng các đột biến tin cậy. Độ đặc hiệu của bộ kit là 100% và độ nhạy > 1%. Bộ kit Mito-6- mutations q.PCR đã được sử dụng để điều tra sự có mặt các đột biến A3243G, G3380A, A8344G, Ị T8993G. T8993C, GI 1778A ở 69 bệnh nhân nghi bị bệnh ty thể tại Bệnh viện Nhi Trung ương và đà phát hiện được 3 trường hợp mang đột biến A3243G chiếm 4.34%, các thành viên của gia đình của 2 bệnh nhân mang đột biến A3243G cũng được phân tích về sự có mặt và tỷ lệ đột biến A3243G, kết quả cho thấy đột biến này được di truyền từ mẹ sang con và tồn tại ở dạng không đồng 1 nhất trong tế bào. Tỷ lệ đột biến có tương quan với biểu hiện lâm sàng của bệnh. Ngoài ra, bộ kit cùng đã được sử dụng để khẳng định kết quả phát hiện và định lượng thành công đột biến GI 1778A Ị vàT8993C ở bệnh nhân trong nghiên cứu trước đây.
|
